Sisällys
ELISA -testi: mikä on periaate?
Määritelmä: mikä on ELISA -testi?
Linkitetty entsyymin immunoabsorptioanalyysitekniikka-englanniksi Enzyme-Linked Immuno Assay-tai ELISA-testi on immunologinen testi, joka mahdollistaa molekyylien havaitsemisen tai määrityksen biologisessa näytteessä. Sen suunnittelivat ja kehittivät kaksi ruotsalaista tiedemiestä, Peter Perlmann ja Eva Engvall Tukholman yliopistossa vuonna 1971.
ELISA -menetelmällä määritetyt molekyylit ovat yleensä proteiineja. Ja näytetyyppejä ovat nestemäiset biologiset materiaalit -plasma, seerumi, virtsa, hikoilu -, soluviljelyalusta tai yhdistelmäproteiini -proteiini, jonka tuottaa solu, jonka geneettistä materiaalia on muutettu geneettisellä rekombinaatiolla -puhdistettu liuokseksi.
ELISA -testiä käytetään pääasiassa immunologiassa proteiinien, vasta -aineiden tai antigeenien läsnäolon havaitsemiseksi ja / tai mittaamiseksi näytteestä. Tämä serologinen testi havaitsee erityisesti vasta -aineet, joita elimistö tuottaa viruksen saastumisen vuoksi.
Tartuntatautien ELISA -testin periaate
Vasta -aineiden käyttö tartuntatautien diagnosointiin on erityinen ja nopea menetelmä. ELISA-tekniikka on immuunientsymaattinen tekniikka, joka mahdollistaa biologisen näytteen avulla visualisoida antigeenin-elävän organismin vieraana pitämän ruumiin-ja vasta-aineen väliset reaktiot käyttämällä entsyymimarkkerin tuottamaa värireaktiota- yleensä alkalinen fosfataasi ja peroksidaasi - aiemmin liitetty vasta -aineeseen. Värireaktio vahvistaa eristetyn bakteerin tunnistamisen tai halutun viruksen läsnäolon, ja värin voimakkuus ilmaisee antigeenien tai vasta -aineiden määrän tietyssä näytteessä.
Erilaisia ELISA -testejä
ELISA -testiä on neljä päätyyppiä:
- ELISA suoramahdollistaa vasta -aineiden havaitsemisen tai mittaamisen. Se käyttää vain primaarista vasta -ainetta;
- ELISA epäsuora, joka on yleisimmin käytetty, mahdollistaa myös vasta -aineiden havaitsemisen tai määrityksen. Se käyttää sekundaarista vasta -ainetta, joka antaa sille paremman herkkyyden kuin suora ELISA;
- ELISA kilpailee, mahdollistaa antigeenien annostelun. Joukkovelkakirjoista kilpaileva tuote ei käytä entsyymiä;
- ELISA "voileipässä", mahdollistaa antigeenien annostelun. Tätä tekniikkaa käytetään yleisesti tutkimuksessa.
Käyttämällä ELISA -testiä
ELISA -testiä käytetään:
- Etsi ja mittaa vasta -aineita serologiasta tartuntatautien diagnosoimiseksi: virologia, parasitologia, bakteriologia jne .;
- Annosproteiinit pieninä pitoisuuksina: tiettyjen plasman proteiinien spesifiset annokset (immunoglobuliini E (IgE), ferritiini, proteiinihormonit jne.), Tuumorimarkkerit jne .;
- Annos pieniä molekyylejä: steroidihormonit, kilpirauhashormonit, lääkkeet ...
Yleisimmät tapaukset: Covid-19, denguekuume, HIV, Lyme, allergiat, raskaus
ELISA -testiä käytetään erityisesti monien tartuntatautien diagnosointiin:
Sukupuolitaudit
Mukaan lukien hepatiitti, kuppa, klamydia ja HIV. Terveysviranomaisten suosittelema se on tärkein aids-seulontatesti: se osoittaa HIV-vasta-aineiden ja p24-antigeenin läsnäolon kuusi viikkoa tartunnan jälkeen.
Alueelliset tai endeemiset sairaudet
Keltakuume, Marburgin virustauti (MVM), Ladengue, Lymen tauti, Chikungunya, Rift Valley -kuume, Ebola, Lassa -kuume jne.
Covid-19
Jos ELISA-testi suoritetaan yli 2–3 viikon kuluttua oireiden alkamisesta, sen avulla voidaan tunnistaa alle tunnissa SARS-CoV-2-vasta-aineiden esiintyminen.
Prenataalisia infektioita aiheuttavat viruspatogeenit
Esimerkiksi toksoplasmoosi, vihurirokko, sytomegalovirus, herpes simplex.
Muut tapaukset
Mutta hän on myös löytänyt sovelluksia havaitsemiseen:
- Raskaudet;
- Autoimmuunisairaudet;
- Ruoka -allergeenit: kokonaisimmunoglobuliinien E (IgE) määrällinen määrittäminen auttaa arvioimaan ja hoitamaan allergioita;
- Hormonaaliset häiriöt;
- Kasvaimen markkerit;
- Kasvien virukset;
- Ja paljon muuta
Covid-19-testin luotettavuus
Osana SARS-CoV-2-vasta-aineiden havaitsemista Institut Pasteurin, CNRS: n, Insermin ja Pariisin yliopiston elokuussa 2020 tekemä pilottitutkimus vahvistaa ELISA-testin luotettavuuden: molemmat ELISA-testit käyttävät koko SARS-CoV-2: n (ELISA N) N-proteiini tai viruksen piikin (S) solunulkoinen domeeni kohdeantigeeneinä. Tämä tekniikka mahdollistaisi vasta-aineiden tunnistamisen yli 90%: ssa tapauksista, ja erittäin alhainen 1%: n vääriä positiivisia prosentteja.
ELISA -testin hinta ja korvaus
Analyysilaboratorioissa lääkemääräyksellä suoritettavat Elisan testit maksavat noin 10 euroa ja sairausvakuutus korvaa 100%.
Ne suoritetaan ilmaisissa tieto-, seulonta- ja diagnostiikkakeskuksissa (CeGIDD), ja ne voivat olla ilmaisia HIV: lle ja SARS-CoV-2: lle.